ELISA試劑盒常用四種方法的優(yōu)勢介紹:
比賽法:樣本里的抗原和純化并固定在固相載體上的抗原一起比賽相同的抗體,當(dāng)樣品里的自在抗原越多,就能夠聯(lián)絡(luò)越多的抗體,而固定抗原就只能聯(lián)絡(luò)到較少的抗體,反之亦然,經(jīng)清洗進(jìn)程,洗去自在抗原和抗體的復(fù)合物,只留下固定抗原和抗體的復(fù)合物,拿來與只需固定抗原的對(duì)照組效果相比照,根據(jù)呈色差異就可計(jì)算出樣品里的抗原含量。
優(yōu)勢:高靈敏、高專一性,抗原無須事前純化。
間接法:與直接法相似,不相同在于一級(jí)抗體沒有酶符號(hào),改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測定抗原量。
ELISA試劑盒優(yōu)勢:二抗能夠加強(qiáng)信號(hào),而且有多種挑選能做不相同的測定分析,不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保留它zui多的免疫反應(yīng)性。
雙抗體夾心法:被查看的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其間一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。
另一個(gè)則是查看抗體,此抗體可用酶符號(hào)后直接測定抗原的量,或不符號(hào),再透過酶符號(hào)的二級(jí)抗體來測定抗原的量,這兩種抗體有必要留神挑選,才可防止交互反應(yīng)或比賽相同的抗原聯(lián)絡(luò)部位。
優(yōu)勢:可適用比照不純的樣本,而且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
直接法:將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號(hào)的一級(jí)抗體,即可測定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。
ELISA試劑盒優(yōu)勢:操作手續(xù)簡略,因無須運(yùn)用二抗可防止交互反應(yīng)。
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