轉眼,八月就快結束了,在這個熱氣沖天的八月,用一個字描述它,是“熱”;用兩個字描述它,是“很熱”;用三個字描述它,是“十分熱”。在這個熱氣直逼的夏天,今日基免生物小編給咱們總結下這個八月,客戶遇到的一些常見問題。
問題一:抗原檢測出的分子量比資料上的大,是怎么回事?
答:1.抗原形成了二聚體。增多巰基乙醇量,煮沸變性時刻延長,能夠翻開二聚體。
2.蛋白自身的修飾如:糖基化,磷酸化等
問題二:為什么我的細胞提取液中沒有方針蛋白?
答:1. 你的細胞中不表達這種蛋白質,換一種細胞。
2.你的細胞中的蛋白質被降解掉了,你必需參加PMSF,按捺蛋白酶活性。
3.你的抗體不能辨認方針蛋白,多看看說明,看是否有問題。
問題三:氣候這么熱,ELISA試劑盒開封后剩下試劑應該如何保存?
答:針對已開封的試劑盒,剩下試劑仍需依照試劑瓶標簽所示的溫度保存,運用后的剩下試劑盒主張在試驗后1個月內運用完畢,產品過期時刻以盒子上的標簽為準,保質期內一切組分都保證是安穩(wěn)的。
問題四:試驗成果不顯色或顯色值低什么原因?
答:1.底物制造問題或底物已失效。2.酶標抗體中酶失活或功率低或漏加酶標抗體。
3.抗原抗體不匹配。4.稀釋度太高。5.洗板次數(shù)過多,洗刷沖擊力太大等原因。
問題五:要驗證某個細胞上有無該蛋白的存在,需要做免疫組化和western blot試驗嗎?
答:免疫組化能夠用來進行定位,可是不能定量,并且有時會有假陽性,不易與布景區(qū)別;Western blot能夠特異性檢測某個蛋白質分子,進行定量,可是不能定位。
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