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培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防細(xì)胞支原體的污染：
A. 控制環(huán)境污染

B. 嚴(yán)格實驗操作

C. 細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌

D. 在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素

E. 避免細(xì)胞污染，可以從預(yù)防著手，超凈工作臺物品放置要合理、進入細(xì)胞房要換鞋和穿實驗服、實驗員戴手套后要用酒精等消毒、避免細(xì)胞交叉污染等等

培養(yǎng)方法：

收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細(xì)胞生長情況，如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

從實驗室的設(shè)計到實驗過程中的操作，都需要嚴(yán)格控制無菌。由于細(xì)胞對于生長的條件比較苛刻，所以無論從實驗室的設(shè)計，還是使用的物品及細(xì)胞培養(yǎng)的操作過程，都要注意保持無菌環(huán)境。

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細(xì)胞復(fù)蘇步驟：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

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