ELISA試劑盒變質是ELISA實驗中比較常見的問題,那么,ELISA試劑盒變質是因為什么呢?是什么影響了ELISA試劑盒質保?一旦變質會有什么影響呢?晶抗生物為大家詳細分析下。
操作因素
ELISA試劑盒操作步驟復雜,操作不當將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色.
方法學的影響
酶聯(lián)免疫吸附試驗測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、|GM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb、HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不Gong平竟爭等因素的影響,結果重復性較差,質量較難控制.
試劑因素
不同批次的ELISA試劑盒在制作過程中很難保證質量一致,即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑并保證保存條件.嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的復雜過程,并且能夠保證結果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復凍融造成試劑的失效.
樣本因素
標本干擾因素包括內源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體等,后者包括標本溶血、標本被污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等.
灰區(qū)的設置
通常情況下,ELISA試劑盒定性實驗以“陽性"和“陰性"來報告結果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值"(截止值,CO值),這是定性免疫測定結果報告的依據(jù).
常表示結果的常用方法
1.定性測定
2.半定量測定結果一般以滴度表示.
3.定量測定即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行EL ISA測定,繪制標準曲線,結果以絕對量或單位表示.在酶聯(lián)免疫吸附試驗定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線,
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