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細胞培養(yǎng)基的清洗
更新時間:2015-06-07   點擊次數:1282次

在組織培養(yǎng)過程中,離體細胞對任何毒性物質都十分敏感。毒性物質包括解體的微生物及細胞殘余物以及非營養(yǎng)的化學物質,因此對新采用和重新使用的培養(yǎng)皿等培養(yǎng)用品都要嚴格清洗和消毒。
清洗步驟:按浸泡→刷洗→浸酸→沖洗等四步程序進行。
①浸泡:新購進的玻璃器皿常帶有灰塵,呈弱堿性,或帶有鉛、碑等有害物質,故先用自來水浸泡過夜、水洗,然后再用2%~5%鹽酸浸泡過夜或煮沸30min,水洗。要領:培養(yǎng)用后的玻璃器皿要立即泡入清水中,使下道刷洗工作能順利進行。用后的玻璃器皿常帶有大量的蛋白質附著,干涸后不易刷洗掉,用后要立即用清水浸泡。
②刷洗:用軟毛刷、洗滌劑,刷去器皿上的雜質,沖洗晾干。要領:浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗滌劑去器皿上的雜質、刷洗次太多,會損害器皿的表面光潔度,洗滌劑有使pH上升的趨勢,所以易選用軟毛刷和洗滌劑。禁止用去污粉。因其中含有砂粒。會嚴重破壞玻璃器皿的光潔度。特別注意刷洗瓶角部位。酸浸之前要把洗滌劑沖干凈。
③浸酸:將器皿浸泡于清潔液24h,如急用也不得少于4h。清潔液由重鉻酸鉀、濃硫酸及蒸餾水配制而成,具有很強的氧化作用,去污能力很強。經清潔液浸泡后,玻璃器皿殘留的末刷洗掉的微量雜質可被*清除。
④沖洗:先用自來水充分沖洗,吸管等沖流10min,瓶皿需每瓶灌滿、倒掉,反復10次以上。然后再經蒸餾水漂洗3次,不留死角。晾干或烘干備用。對已用過的器皿,凡污染者必先經煮沸30min或放3%鹽酸中浸泡過夜,未污染者可不需滅菌處理,但仍要刷洗、清潔液浸酸過夜,沖洗等。

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